ФЕРМЕНТАТИВНА АКТИВНІСТЬ РЯДУ ОКСИДОРЕДУКТАЗ ЯК ПОКАЗНИК ЗБЕРЕЖЕННЯ НАТИВНОЇ ПРИРОДИ БІЛКІВ У ГІДРОТРОП-ІНДУКОВАНІЙ ФАЗІ ДОДЕЦИЛСУЛЬФАТУ НАТРІЮ: УДК 544.77.03:53+543.9

А. Зимогляд; В. Старова; C. Куліченко

Автор(и)

А. Зимогляд, студ. Київський національний університет імені Тараса Шевченка
В. Старова, канд. хім. наук Київський національний університет імені Тараса Шевченка
C. Куліченко, канд. хім. наук Київський національний університет імені Тараса Шевченка

Ключові слова:

міцелярна екстракція, гідротроп-індукована фаза, додецилсульфат натрію, білки, нативний стан

Анотація

Здатність гідротроп-індукованої міцелярно-екстракційної системи ДДСН-NaCl-H₂Sal вилучати білки із збереженням їхньої нативності була перевірена на прикладі модельних білкових субстратів пероксидази, каталази та нітратредуктази, що проявляють ферментативну активність лише в нативному стані. Зміну каталітичної активності пероксидази й каталази в міцелярній фазі ДДСН використали як показник збереження нативності білків та встановлювали методом перманганатометричного титрування за кількістю H₂O₂, що був розкладений під дією ферменту. Активність нітратредуктази визначали спектрофотометрично за реакцією нітрит-іонів, сформованих унаслідок ферментативного розкладу нітратів, з реактивом Гріса. Установлено, що каталітична активність пероксидази, нітратредуктази та каталази в міцелярній фазі ДДСН порівняно з водним розчином зростає у два, три та чотири рази відповідно. Таке збільшення каталітичної активності оксидоредуктаз підтверджує збереження нативної природи білків після концентрування їх у гідротроп-індуковану фазу ДДСН.

Посилання

1. Johnson M., Yakimchuk К. Materials and methods, 2013, 3, 163.

2. Matar-Merheb R., Rhimi M., Leydier A., Huchй F., Galiбn C., Desuzinges-Mandon E., Ficheux D., Flot D., Aghajari N., Kahn R., Di Pietro A., Jault J.M., Coleman A.W., Falson P. PLoS ONE, 2011, 6(3), e18036.

3. Kulichenko S.A., Starova V.S. Chem. Pap., 2010, 64 (1), 98–105.

4. Starova V.S., Kulichenko S.A. J. Anal. Chem., 2010, 65 (12), 1244–1249.

5. Gonzбlez de la Vara L.E., Alfaro B.L. Anal. Biochem., 2009, 387 (2), 280–286.

6. Давлетшин А.И., Сильвестрова И.Г., Зубов В.П., Егоров В.В. Вестн. Моск. ун-та. Сер. 2. Химия, 1998, 39 (4), 272–275.

Davletshin AI, Silvestrov IG, Zubov VP, Egorov V.V. Vestn. Moscow. Un-ta. Ser.2. Chemistry, 1998, 39 (4), 272–275.

7. Еремин А.Н., Карасева Е.И. Биоорганическая химия, 1991, 17 (5), 610–617.

Eremin A.N., Karaseva E.I. Bioorganic Chemistry, 1991, 17 (5), 610–617.

8. Brewer G.J. Singh M. J. Gen. Virol., 1982, 60 (1), 135–146.

9. Кукушкина А.Н., Деркач С.Р., Ужинов Б.М., Левачев С.М., Сакваре-лидзе М.А. Известия Калининградского государственного технического университета, 2008, 13, 59–62.

Kukushkina A.N., Derkach S.R., Uzhinov B.M., Levachev S.M., Sakvarelidze M.A Izvestija Kaliningradskogo gosudarstvennogo tehnicheskogo universiteta, 2008, 13, 59–62.

10. Кудряшова Е.В., Гладилин А.К., Левашов А.В. Успехи биологиче-ской химии, 2002, 42, 257–294.

Kudryashova E.V., Gladilin A.K., Levashov A.V. Uspehi biologicheskoj himii, 2002, 42, 257–294.

11. Mackie A., Wilde P. Adv. Colloid Interface Sci., 2005, 117 (1–3), 3–13.

12. Tofani L., Feis A., Snoke R.E., Berti D., Baglioni P., Smulevich G. Biophys. J., 2004, 87 (2), 1186–1195.

13. Chodankar S., Aswal V.K., Hassan P.A., Wagh A.G. Physica B Condenc. Matter., 2007, 398 (1), 112–117.

14. Shweitzer B., Zanette D., Itri R. J. Colloid Interface Sci., 2007, 277 (2), 285–291.

15. Наджафова О.Ю., Дроздова М.В., Босак В.З. Вісник Київського національного університету імені Тараса Шевченка. Хімія, 2006, 43, 23–25.

Najafova O.Yu., Drozdova M.V., Bosak V.Z. Visnyk Kyivs'koho natsional'noho universytetu imeni Tarasa Shevchenka. Khimiya, 2006, 43, 23–25.

16. Наджафова О.Ю. Методичні вказівки до виконання лабораторних робіт з курсу "Біоаналітика" для студентів хімічного факультету кафедри аналітичної хімії. К.: ВПЦ Київський університет, 2006, 35 с.

Najafova O.Yu. Methodical instructions for the implementation of laboratory works on the course "Bioanalysis" for students of the chemical faculty of the Department of Analytical Chemistry. Kyiv, VPC Kyiv University, 2006, 35 p.

17. Desvergne B., Wahli W. Endocr. Rev., 1999, 20 (5), 649–688.

18. Современные проблемы биохимии. Методы исследований: учеб. пособие. Под ред. проф. А.А. Чиркина. Минск: Выш. шк., 2013, 497 с.

Modern problems of biochemistry. Methods of Research. Ed. by Prof. A.A. Chirkin. Minsk: Higher Education school, 2013, 497 p.

19. Запорожець О.А., Наджафова О.Ю., Смик Н.І. Методичні вказівки до лабораторних робіт з аналітичної хімії для студентів другого курсу хімічного факультету. К.: Київський ун-т, 2005, 50 с.

Zaporozhets O.A., Najafova O.Yu., Smyk N.I. Methodical instructions for laboratory studies on analytical chemistry for second-year students of the chemical faculty. Kyiv, Kyiv Univ., 2005. 50 p.